Mida tähendab PCR nukleiinhapete tuvastamine, meetodid ja etapid
Nukleiinhapete testimine on praegu tõhus viis kindlaks teha, kas viirus kannab uut koroonaviirust. Praegu kasutavad inimesed võrdluseks peamiselt nina-, kurgu- ja antikehaseerumi lgm-d. Kuid Singapuri viimaste sisenemisnõuete kohaselt tehakse PCR-i nukleiinhapete testimine, nii et mida tähendab PCR-i nukleiinhapete testimine?
Mida tähendab PCR nukleiinhapete tuvastamine
PCR tähendab polümeraasi ahelreaktsiooni, mida saab kasutada DNA amplifitseerimiseks, et amplifitseerida väikest kogust DNA-d nii palju, et seda on võimalik tuvastada. Mõnede viiruste nukleiinhape on DNA ja seda meetodit tuleb tuvastamiseks kasutada. Seetõttu ei ole PCR mitte teostatav kontroll, vaid DNA tuvastamise meetod. Näiteks B-hepatiidi viiruse DNA kvantifitseerimiseks kasutatakse seda meetodit. DNA-kontrolli eesmärk on ühelt poolt haigus diagnoosida. Kui on võimalik tuvastada isegi patogeeni DNA, tähendab see, et patogeen on nakatunud; teisest küljest on see selleks, et hinnata, kui palju viirus on paljunenud, et hinnata haiguse tõsidust või ravi mõju.
PCR nukleiinhapete tuvastamise meetodid ja etapid
Nukleiinhapete testimine nõuab viit etappi: proovide võtmine, proovi säilitamine, säilitamine, nukleiinhapete ekstraheerimine ja arvutitestimine.
Nukleiinhapete tuvastamise esimene samm on inimese sekreedi kogumine ja ninaõõne või neelu tagaseina ja kahepoolsete neelumandlite pühkimine nina- või neelutestiga.
Teises etapis hoidsid meditsiinitöötajad proovi alles, kastsid katsekeha pea rakkude säilituslahusesse ja keerasid katseklaasi korgi kohe peale saba murdmist.
Kolmandas osas pane proov õhukindlasse kotti, hoia alles ja saada õigeaegselt kontrolli.
Neljas samm on proovi saatmine laborisse nukleiinhappe ekstraheerimiseks.
Viiendas etapis viiakse ekstraktiga läbi fluorestsents-PCR amplifikatsioonireaktsioon.
Mis on nukleiinhape
Nukleiinhape (nukleiinhape) on teatud tüüpi bioloogiline makromolekul, mis koosneb nukleotiididest (nukleotiidist), jaguneb ribonukleiinhappeks (RNA) ja desoksüribonukleiinhappeks (DNA), milles RNA on enamasti üheahelaline struktuur, DNA on enamasti kaheahelaline struktuur. Nukleiinhape on lisaks prioonile eluks vajalik bioloogiline makromolekul. Selle peamine ülesanne on moodustada elu geneetilise teabe kandja. Lisaks saab mõnda nukleiinhapet kasutada bioloogiliselt aktiivsete ensüümidena ja osaleda nende moodustamises. Molekulid või muud molekulaarmasinad.
Mis on nukleiinhapete testimine
Nukleiinhapete tuvastamine, nagu nimigi viitab, on nukleiinhapete tuvastamine.
Millised on nukleiinhapete testimise ainulaadsed eelised? Miks saab seda kasutada"kullastandardina" uue koroonaviiruse diagnoosimiseks?
Tegelikult on igal tuvastamismeetodil oma rakendusstsenaariumid. Võttes näiteks viiruse tuvastamise, on tavaliste immunoloogiliste tuvastamismeetodite (kolloidkuld, ELISA, kemoluminestsents jne) tuvastamisobjektiks viiruse antigeen või antikeha, mis on samaväärne"side joonisega". Kuna nakatumisest kuni tuvastatavuseni on ajaaken, ei sobi immunoloogilised tuvastamismeetodid üldiselt varajaseks diagnoosimiseks.
Mida tähendab PCR nukleiinhapete tuvastamine, meetodid ja etapid
Valepositiivsed ja valenegatiivsed
1. Valepositiivne
Tavaliselt on valepositiivseid tulemusi vähem. Üldjuhul võib laboritöötajate ebaõige töö põhjustada proovide ristsaastumist või amplifitseeritud toodete jääksaastumist. Sel juhul võivad tekkida valepositiivsed tulemused.
Valepositiivsetest tulemustest saab aga tõhusalt mööda hiilida, kontrollides rangelt avastamisprotsessi ja rakendades strateegiat, mille kohaselt osaletakse juhuslikult mitme negatiivse proovi tuvastamisel.
2. Valenegatiivne
Siin tuleb selgitada, et valenegatiivsed PCR-tuvastuse ja kliinilised valenegatiivsed ei ole tegelikult sama mõiste.
Võttes näiteks uue koroonaviiruse diagnoosi, mille üle internetis palju räägitakse, viitavad kliinilised valenegatiivsed juhtumid juhtumitele, kus kliinilised sümptomid ja pildiuuringud on väga nakatumiskahtlusega, kuid PCR-test on korduvalt või alati negatiivne; ja PCR test valenegatiivne viitab kogutud Proovis on piisav kogus uut koroonaviirust, kuid seda ei ole tuvastatud.
Valenegatiivsete tulemuste vältimiseks nukleiinhapete testimisel tuleb lahendada peamised vajadused: (1) nakatunud inimese rakkudes on piisavalt viirust, (2) viirust sisaldavad rakud saab koguda kogutud proovist ja (3) ) proovis leiduv viirus tuvastatakse Need kolm linki.
Nende hulgas mõjutavad PCR-komplektide tehnilised parameetrid peamiselt kolmandat tuvastamislüli.
Ainult kolmanda testlingi puhul, kui viiruste arv proovis on alla teatud taseme (alla minimaalse avastamispiiri), ei suuda PCR komplekt seda tuvastada. Sellest vaatenurgast ei saa PCR-i tuvastamisel valenegatiivseid tulemusi täielikult vältida. Seetõttu on vaja täiendada viirusspetsiifiliste antikehade testimise väljatöötamist.