Kuidas kasutada pipetti laboris – täielik juhend

Sep 23, 2022 Jäta sõnum


Alates keskkoolidest ja ülikoolidest kuni tipptasemel uurimiskeskusteni on pipetid laborites üle maailma põhivara. Need väikesed, kuid väga funktsionaalsed instrumendid on erineva suuruse, disaini ja võimsusega, kasutades olenevalt rakendusest erinevaid pipette. Allpool vaatleme parimaid tavasid pipettide laboris kasutamiseks. Samuti käsitleme mõningaid olulisi pipeti fakte, sealhulgas instrumendi ajalugu, pipetimudelite tüüpe ja pipetilabori instrumentide kasutamist.


pipetiga


Mis on laboripipett?


Laboripipetid on spetsiaalsed tööriistad, mis võimaldavad teadlastel vedelikke ohutult ja täpselt tarnida. Tavaliselt kasutatav bioloogia-, keemia- ja meditsiinilaborites sarnaneb see kolbajamiga instrument süstlaga ja sellel on palju erinevaid konstruktsioone, alates lihtsatest ühes tükis klaaspipettidest kuni keerukate elektrooniliste pipettideni. Erinevate disainilahenduste täpsus ja täpsus on väga erinev ning laborid valivad pipete vastavalt oma ainulaadsetele vajadustele. Mõned pipetid on käsitsi juhitavad, teised kasutavad automatiseeritud tehnikaid.


Kuidas laboripipetid töötavad?


Enamik laboripipette kasutab vedelike aspireerimiseks ja vabastamiseks vedeliku hoidekambri kohal õhuvaakumit. See õhuväljasurve on mõeldud kasutamiseks nii käsitsi kui ka elektripipettide puhul ja seda võib näha otsiku sisestamisel otse vedeliku pinna alla. Seejärel vabastatakse rõhk kolvile, tõmmates vedelikku otsa. Vedeliku vabastamiseks avaldatakse kolvile survet, mis surub vedeliku kambrist alla tagasi ja otsast välja.


Laboripipettide ajalugu


Kui pipetikontseptsioon on olnud kasutusel üle sajandi, patenteeriti esimene mikropipett alles 1957. aastal. Selle töötas välja Saksa teadlane dr Heinrich Schnitger, tööstusharu juhtiva laboriseadmete tootja Eppendorfi asutaja. Schnitger alustas kommertstootmist 1961. aastal ja mikropipetid said kiiresti populaarseks laborites üle maailma.


Ameerika leiutaja Warren Gilson ja biokeemiaprofessor Henry Lardy on samuti tunnustatud reguleeritavate mikropipettide väljatöötamise eest. Reguleeritavad mikropipetid on saadaval erineva suuruse ja mahu kombinatsioonides, et suurendada laboratoorset paindlikkust.


Mikro- ja suured pipetid


Mikropipetid on loodud täpsust silmas pidades, võimaldades teadlastel mikroliitrises vahemikus vedelikke täpselt ekstraheerida, transportida ja doseerida. Mikropipeti mahud on vahemikus 1 kuni 1 000 mikroliitrit. Mikropipetid on mõeldud suurte partiide jaoks mahuga 0,25–5 ml.


Laboripipettide tüübid


Aastakümnete jooksul on tootjad spetsiaalsete rakenduste jaoks välja töötanud mitmesuguseid pipette. Tänapäeval on pipete lugematu kujundusega ning erinevate mudelite täpsus ja täpsus on väga erinev. Allpool on loetletud mõned laboris levinumad pipetid.


ühe kanaliga pipett


Ühe kanaliga pipetid, tuntud ka kui muutuva mahuga õhuväljasurve pipetid, on mitmekülgsed ja neid saab kasutada mitmesugustes rakendustes. Enamik neist pakub laia mahuvahemikku 0 kuni 2500 mikroliitrini. Olenevalt rakendusest võivad teadlased kasutada reguleeritavaid fikseeritud mahuga ühe kanaliga pipette.


Ühe kanaliga pipettide väike ja kompaktne olemus tähendab, et need sobivad ideaalselt kasutamiseks väikestes lähte- ja sihtanumates, nagu koonilised torud ja klapiga anumad. Ühe kanaliga pipetid pole mitte ainult väikeste mahutite jaoks piisavalt kompaktsed, vaid sobivad hästi ka kaevude ja kaevuplaatidega.


Kvaliteetsed ühe kanaliga pipetid ei ole mitte ainult tõhusad, vaid ka ergonoomilised, loodud selleks, et muuta kasutajakogemus võimalikult intuitiivseks ja mugavaks. See aitab minimeerida korduvate pingevigastuste riski ning suurendab täpsust ja täpsust.


Kuigi kompaktsed ja hõlpsasti kasutatavad, saab ühe kanaliga pipette kasutada ainult ühe vedelikuproovi korraga ülekandmiseks. See tähendab, et mitme ülekande korral võib nende kasutamine olla tüütu ja aeganõudev.


mitme kanaliga pipett


Mitmekanalilised pipetid sobivad ideaalselt mikroplaatide rakenduste jaoks ning sobivad ideaalselt väikesemahuliste rakenduste ja korduvate ülesannete jaoks. Enamikul neist on 8–12 pead, mis võimaldab teadlastel ühe seadmega mitut vedelikuproovi üle kanda.


Tootlikkus on mitme kanaliga pipettide üks peamisi eeliseid ning tehnoloogia vähendab oluliselt vajalike üksikute ülekannete arvu. Neid eelistavad sageli teadlased, kes töötavad polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR), ensüümiga seotud immunosorbentanalüüside (ELISA) ja rakukultuuri uurimisega.


Kuigi mitmekanalilised pipetid vähendavad vajalike üksikute ülekannete arvu, põhjustavad need siiski käte väsimust. Seetõttu on paljudel mitmekanalilistel pipettidel vedruga otsad, mis vähendavad käte survet, minimeerivad korduvate pingutusvigastuste ohtu ja parandavad pipeti funktsionaalsust laboris.


elektriline pipett


Korduvad pingevigastused on laboriteadlaste jaoks üks levinumaid riske. Elektroonilised pipetid vähendavad vigastuste ohtu tänu automaatsele õhutusprotsessile. Sisemiste mootoritega elektroonilised pipetid tagavad sama täpsuse kui käsitsi kasutatavad pipetid, kuid ilma füüsilise koormuseta. Elektroonilised pipetid on eriti kasulikud mitmekordsel väljastamisel, mis hõlmab reaktiivide jagamist erinevateks annusteks.


Näiteks teadlased, kes kannavad PCR-i põhisegusid 96-süvendiplaatidele, saavad elektrooniliste pipettide kasutamisest palju kasu. Manuaalse pipeti kasutamine nõuab 96 eraldi ülekannet, mis tooks kaasa märkimisväärse ergonoomilise pinge. Seevastu elektroonilised pipetid võivad ülekandeaegu lühendada 30 protsenti või rohkem, olenevalt otsa suurusest ja ülekantava vedeliku mahust. Lisaks aja säästmisele vähendab elektrooniliste pipettide kasutamine ka käte vigastuste ja väsimuse ohtu.


Õhu nihke kiirust ja hajumist reguleeritakse sisemise mootoriga, mis aitab vähendada tünni saastumist ja takistab õhumullide teket. Neid saab eelnevalt programmeerida, et need sobiksid konkreetsete laboriülesannetega, suurendades tõhusust. Elektroonilised pipetid pakuvad ka reguleeritavat otsavahet, mis võimaldab teadlastel mitut proovi korraga üle kanda.


Mitmekanaliline elektrooniline pipett


Mitme kanaliga elektroonilised pipetid ühendavad mitme pea tõhususe automatiseerimise ergonoomiliste eelistega. Mõlema tehnika kasutamine võib oluliselt parandada mikroplaatide täitmise efektiivsust. Paljudel juhtudel saab ülesande täitmiseks kuluvat aega lühendada vähem kui minutini.


Seroloogiline pipett


Koe- ja rakukultuuri rakendustes on seroloogilised pipetid tavaliselt valmistatud klaasist või polüstüreenist. Laborites, kus steriliseerimine on prioriteet, kasutavad teadlased sageli vastupidavast plastikust valmistatud ühekordseid pipette. Seroloogilisi pipette kasutatakse tavaliselt ka üle 1 ml vedeliku annuste korral.


Manuaalne stepper pipett


Kuni 5 ml väljastusvahemikuga pipett on ideaalne põhiliste ja korduvate ülesannete jaoks. Need töötavad positiivse nihke põhimõttel ja neid saab kasutada väikeste proovide kiireks järjestikuseks väljastamiseks ilma kambrit uuesti täitmata. Positiivse nihke põhimõttele tuginedes sobivad käsitsi astmelised pipetid ideaalselt raskesti käsitsetavate viskoossete ja lenduvate vedelike jaoks.